人CYB5R2基因真核表达载体的构建

作者：余娜娜; 杜春平; 肖雪; 侯波; 黄光武; 张哲

来源：中国临床新医学, 2011, (08): 695-699.

• 鼻咽癌
• CYB5R2基因
• 真核表达载体 Nasopharyngeal carcinoma
• CYB5R2 gene
• Eukaryotic expression vector

目的构建人CYB5R2基因真核表达载体,并观察其在人鼻咽癌细胞HONE1中的表达。方法根据表达载体pCMV-Tag3A上的多克隆位点和CYB5R2基因CDS序列设计引物,应用RT-PCR从人睾丸cDNA中克隆出CYB5R2的CDS,并进行TA克隆。对经PCR、双酶切和双向测序验证正确的质粒,进行CDS目的片段的回收,将其连接于pCMV-Tag3A载体的多克隆位点内构建真核载体,然后进行PCR、双酶切和双向测序验证。脂质体法转染鼻咽癌细胞HONE1细胞,荧光显微镜观察和RT-PCR验证该基因的表达。结果 PCR、双酶切和双向测序结果显示pCMV-Tag3-CYB5R2-CDS真核表达载体构建成功...

• 单位
  广西医科大学第一附属医院