烟雾提取物对转化生长因子β1刺激的人胚肺成纤维细胞增殖及分化的影响

作者：郑鑫; 纵加强; 王佳新; 陈旭昕; 韩志海^*

来源：国际呼吸杂志, 2022, 42(22).

• 转化生长因子β1
• 羟脯氨酸
• 烟雾提取物
• Ⅰ型胶原蛋白
• Ⅲ型胶原蛋白
• α平滑肌肌动蛋白

目的研究烟雾提取物(SE)对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激的人胚肺成纤维细胞MRC-5增殖及分泌羟脯氨酸(HYP)、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、Col Ⅲ及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的影响。方法本研究为实验研究。采用完全培养基将通过自制装置提取出的烟雾成分制备成不同浓度(0%、1%、2%、5%、10%)的SE溶液, 选用MRC-5细胞进行细胞培养, 将其分为对照组和TGF-β1组。TGF-β1组在TGF-β1刺激MRC-5细胞1 d后用含不同浓度SE的培养基继续培养48 h, 对照组采用普通培养基和不同浓度SE的培养基培养。通过CCK-8试剂检测细胞活力, 观察不同浓度SE对细胞数量、大小、形态及胶原合成的影响, 并制作细胞爬片, 天狼星红染色后行胶原定量检测, 最后ELISA法检测HYP、Col Ⅰ、Col Ⅲ、α-SMA水平, qRT-PCR检测Col Ⅰ、Col Ⅲ、α-SMA mRNA表达水平。结果对照组中, 不同浓度SE均抑制细胞的增殖, 抑制胶原的合成, 抑制HYP、Col Ⅰ、Col Ⅲ、α-SMA的水平, 且随着浓度增加, 抑制作用越明显;TGF-β1组中, 1%、2%的SE促进细胞的增殖, HYP、ColⅠ、Col Ⅲ、α-SMA的水平增加, 且2%的SE最显著, 5%的SE对细胞的影响不显著, 但10%的SE抑制细胞的增殖, 抑制胶原的表达, Col Ⅰ、Col Ⅲ、α-SMA的水平下降。结论低浓度SE通过TGF-β1介质促进MRC-5细胞增殖与分化, 高浓度SE对MRC-5细胞的增殖与分化起抑制作用, 提示TGF-β1是烟雾吸入损伤后肺纤维化的重要中间介质。

• 单位
  中国人民解放军总医院