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摘要
目的研究受感染宫颈上皮细胞中人乳头瘤病毒整合的检测方法与应用。方法构建串联单拷贝基因重组质粒,用于对经反向斑点杂交法基因检测为16型人乳头瘤病毒感染的宫颈脱落细胞样本进行病毒的早基因分析,通过串联单拷贝基因标准化方法,对采用荧光定量PCR技术分析得到的样本中HBB、病毒早基因E2与E6的检测数据分析,计算HPV病毒整合参数与平均病毒拷贝数,推断E2基因完整性及病毒整合发生、病毒拷贝数与已知的病变进程的相关性。结果构建的重组质粒可有效用于标准化同批次荧光定量PCR检测E2基因、E6基因和HBB基因的数据。37例16型人乳头瘤病毒阳性宫颈细胞样本中,15例样本结果为E2基因已破坏,包括10例高度病变组样本及5例正常组样本。不同组E2基因完整性差异有统计学意义(P<0.05)。E2基因被破坏的样本平均病毒拷贝数比E2基因完整样本显著减少(P<0.05)。结论本研究建立的串联单拷贝基因标准化法用于检测16型HPV感染的宫颈细胞样本中病毒整合导致的E2基因破坏有效可行。
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单位广州市萝岗区妇幼保健所; 广州开发区医院
