激活式复合功能核酸化学发光传感器检测葡萄酒中的赭曲霉毒素A

作者:杨成*; 张亚旗; 林黛琴*; 刘洋; 孙冰冰
来源:Chinese Journal of Analytical Chemistry, 2021, 49(04): 496-503.
DOI:10.19756/j.issn.0253-3820.201705

摘要

构建了以赭曲霉毒素A(OTA)核酸适配体为"裂开型"核酶激活"开关"的化学发光传感器,用于葡萄酒中OTA的高灵敏度检测。K+诱导富含G碱基的寡聚核苷酸折叠成平行G-四链体结构,平行G-四链体与血红素复合生成具有类过氧化物酶活性的核酶,可催化过氧化氢氧化鲁米诺产生化学发光。将OTA核酸适配体序列插入可形成核酶的"裂开型"核酸链中,使核酸适配体成为激活核酶催化活性的"开关"。当体系中不存在OTA时,OTA的核酸适配体呈自由链状,"裂开型"核酶的两段核酸序列距离较远,无法有效形成具有酶活性的复合物,催化活性较低;当OTA存在时,OTA诱导核酸适配体形成反平行G-四链体结构,适配体的两端序列相互杂交,从而拉近"裂开型"核酶的两段核酸序列,使其可形成平行G-四链体结构,并与血红素复合,生成具有明显的类过氧化物酶活性的核酶。以鲁米诺为底物,采用化学发光法实现了OTA的高灵敏检测。本方法的线性范围为0.10~2.00 nmol/L,检出限为0.10 nmol/L。

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