鼠疫耶尔森菌Ⅲ型分泌系统相关蛋白β-内酰胺酶报告系统的建立

作者：韩伟; 谭亚芳; 杨慧盈; 郭兆彪; 杨瑞馥; 伏小平; 杜宗敏

来源：军事医学, 2012, (09): 658-661+672.

• 鼠疫耶尔森菌
• T3SS
• β-内酰胺酶报告基因
• 质粒
• 聚合酶链反应 Yersinia pestis
• β-lactamases reporter gene
• plasmids
• polymerase chain reaction

目的构建鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)Ⅲ型分泌系统(T3SS)相关蛋白β-内酰胺酶(TEM-1β-lactamases,Bla)报告基因载体,旨在运用本系统检测鼠疫菌待测蛋白能否转运至宿主细胞内。方法将TEM基因克隆入pA-CYC184载体中,构建用于鼠疫菌研究的TEM报告基因载体。把待分析的鼠疫菌基因及启动子区克隆入TEM基因上游,使鼠疫菌蛋白与TEM蛋白融合表达。将鼠疫菌基因-TEM融合表达载体电转化到鼠疫菌中,并感染HeLa细胞2 h后,加入CCF2-AM底物,在激光共聚焦显微镜下观察结果。结果与结论应用本系统检测了YopK-Bla、YscK-Bla、YscL-Bla和YscX-Bla进入宿主细...

• 单位
  病原微生物生物安全国家重点实验室; 甘肃农业大学; 军事医学科学院