猪全血中IFN-γ、IL-2、TNF-αTaqMan定量RT-PCR方法的建立及对猪瘟疫苗的免疫评价

作者：汪志艳; 刘永刚; 王刚; 石文达; 武嘉男; 涂亚斌; 姜成刚; 何玉利; 韩梓峰; 李玉明; 王延群; 蔡雪辉

来源：中国预防兽医学报, 2013, (02): 164-168.

• 全血
• 细胞免疫评价
• IFN-γ、IL-2、TNF-α
• TaqMan定量RT-PCR
• 猪瘟活疫苗 whole blood
• cellular immune response assessment
• IFN-γ
• IL-2 and TNF-α
• TaqMan real-time PCR
• CSF attenuated live vaccine

为建立猪相关细胞因子的检测方法,本研究针对GenBank中猪IFN-γ、IL-2、TNF-α的基因设计特异性引物和荧光探针,建立了这3种细胞因子TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法。结果表明,建立的检测方法在101～109拷贝/μL模板范围内具有良好的线性关系,相关系数R2均高达0.999。利用该方法对猪瘟(CSF)活疫苗进行细胞免疫评价,结果显示,CSF疫苗免疫组猪瘟病毒(CSFV)刺激细胞相对于空白对照细胞,IFN-γ、IL-2、TNF-αmRNA表达量在免疫后3 d～10 d之间均显著升高(p<0.05),而IFN-γ在14 d仍保持高水平表达;对照组CSFV刺激细胞和空白对照细胞的...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室; 东北农业大学