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摘要
为了鉴定ste20-like基因在黄曲霉生长、分生孢子形成、菌核形成中的作用以及其侵染性，并比较其与ste20基因功能的差异，以A.flavus NRRL3357为研究对象，对两个基因进行相似度比对和生物信息学分析，根据同源重组策略获得单基因缺失菌株Δste20、Δste20-like和双基因缺失菌株Δdouble(Δste20-like&ste20)，并分析基因敲除对菌株生长、分生孢子形成、菌核形成、黄曲霉毒素B1(AFB1)生物合成和侵染功能的影响。应用pyrG的双向遗传筛选成功获得Δste20、Δste20-like和Δdouble；与野生型相比，单基因缺失和双基因缺失突变株的生长速率、分生孢子量、菌核数量以及侵染能力都显著降低，在毒素合成方面，Δste20、Δste20-like和Δdouble菌株分别降低约76%、93%和72%；突变株之间比较发现，ste20-like缺失对生长速率的影响大于ste20基因；突变株之间的分生孢子产生量无显著差异；Δste20无菌核产生而Δste20-like还有少量菌核产生；Δste20-like菌株产生的毒素显著低于Δste20和Δdouble菌株。ste20-like基因正调控黄曲霉生长、分生孢子生成、菌核形成、AFB1生物合成，并影响黄曲霉分生孢子对粮油种子的侵染能力。与ste20基因功能相比，ste20-like基因在调控黄曲霉生长、毒素合成方面对菌株的影响方面较显著，而在菌核形成方面ste20的基因调控作用更显著。
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