恶性脑肿瘤缺失蛋白1在脓毒症致急性呼吸窘迫综合征大鼠中的表达和作用

作者：葛晨; 张一凡; 贾红炜; 罗钰泉; 祖一文; 杨志伟; 贾丽静; 王景梅; 杜全胜^*

来源：中华危重病急救医学, 2023, 35(02).

• 恶性脑肿瘤缺失蛋白1
• 急性呼吸窘迫综合征
• 脓毒症
• 生物标志物
• 肺泡上皮细胞损伤
• 毛细血管通透性
• 炎症反应

目的观察恶性脑肿瘤缺失蛋白1(DMBT1)在脓毒症致急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠中的表达及其与ARDS相关生物标志物的关系。方法取48只健康雄性Wistar大鼠, 按随机数字表法分为假手术(Sham)组和ARDS模型组, 两组再根据术后6、12、24 h分为3个亚组, 每个亚组8只。Sham组单纯开腹暴露盲肠;ARDS模型组采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症致ARDS模型。分别于术后6、12、24 h观察大鼠的一般表现;取大鼠腹主动脉血, 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清DMBT1、肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素(IL-6、IL-10)水平。取肺组织, 测定肺湿/干质量(W/D)比值;苏木素-伊红(HE)染色后, 光镜下观察肺组织病理学改变, 同时进行肺组织损伤评分;采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测DMBT1蛋白在肺组织中的表达。采用Pearson相关法分析血清DMBT1与SP-D、VEGF、IL-6、IL-10及肺组织损伤评分的相关性。结果 ARDS模型组大鼠术后出现明显病态表现, 光镜下可见肺泡结构破坏、炎症细胞浸润、肺泡出血等, 术后12 h起肺组织损伤评分较Sham组明显升高(分:3.35±0.13比1.16±0.07, P<0.05), 且肺W/D比值较Sham组明显增加(5.36±0.44比4.38±0.35, P<0.05), 存在肺水肿, 提示脓毒症致ARDS模型制备成功。ELISA及Western blotting检测结果显示, ARDS模型组大鼠血清DMBT1、SP-D、VEGF、IL-6水平均随时间延长呈逐渐升高趋势, IL-10呈先升高后下降趋势;与Sham组比较, ARDS模型组血清及肺组织DMBT1的蛋白表达于术后6 h起即明显升高〔血清(ng/L):231.96±19.17比187.44±10.19, 肺组织(DMBT1/β-actin):2.05±0.19比0.93±0.25, 均P<0.05〕, 而血清SP-D、VEGF、IL-6、IL-10水平则于术后12 h起明显升高〔SP-D(ng/L):73.35±8.05比43.28±5.77, VEGF(ng/L):89.85±8.47比43.19±5.11, IL-6(ng/L):36.01±2.48比17.49±1.77, IL-10(ng/L):84.55±8.41比39.83±5.02, 均P<0.05〕。Pearson相关分析显示, ARDS模型组大鼠术后12 h和24 h血清DMBT1与血清SP-D、VEGF、IL-6、IL-10及肺损伤评分均呈显著正相关(12 h:r值分别为0.946、0.942、0.931、0.936、0.748, 24 h:r值分别为0.892、0.945、0.951、0.918、0.973, 均P<0.05)。结论 DMBT1可能通过影响肺泡上皮细胞、肺泡毛细血管和炎症反应成为ARDS的一种新型早期生物标志物。

• 单位
  邯郸市中心医院; 河北省人民医院