SARS-CoV-2非感染性细胞-细胞融合模型的构建

作者：单静; 杨曼清; 尚方建; 刘奇^*

来源：中国病原生物学杂志, 2023, 18(06): 625-629.

DOI：10.13350/j.cjpb.230602

• SARS-CoV-2
• 细胞-细胞融合
• 进入抑制剂

目的 构建一种基于SARS-CoV-2 S蛋白介导的非感染性、可视化细胞-细胞融合模型，用于检测SARS-CoV-2进入抑制剂的抑制活性。方法 构建可同时表达SARS-CoV-2 S蛋白和绿色荧光蛋白EGFP的重组质粒pAAV-EGFP-SARS2-S,在293T细胞瞬时表达(293T/EGFP/SARS-2),将其与靶细胞Huh-7共同培养，模拟病毒侵染靶细胞，分别在2、8、12、24、48 h于荧光显微镜下观察并记录细胞不同时间的融合情况，同时在该模型上评价SARS-CoV-2进入抑制剂EK1的活性。结果 荧光显微镜观察293T/EGFP/SARS-2和Huh-7细胞混合后的细胞融合情况：4 h后发生融合，24 h后可形成大面积融合。SARS-CoV-2进入抑制剂EK1能抑制细胞融合，且呈剂量依赖，其IC50为(287±1.78)nmol/L。结论 成功构建无感染性、成本低廉的SARS-CoV-2进入抑制剂药物检测筛选融合模型，可对天然小分子化合物进行筛选，为冠状病毒药物的研发提供了一种检测途径。

• 单位
  大理大学; 基础医学院