HPV16 E7基因定向突变及表达产物免疫原性研究

作者：张战锋; 刘媛瑞; 徐建华^*

来源：检验医学与临床, 2019, 16(08): 1019-1022.

DOI：10.3969/j.issn.1672-9455.2019.08.004

• 人乳头瘤病毒
• 宫颈癌
• 免疫治疗
• 蛋白表达

目的对人乳头瘤病毒(HPV)16E7基因中与宿主Rb蛋白结合区域进行突变获得HPV16E7突变体(HPV16mE7)序列,原核表达获得HPV16mE7蛋白。方法采用分子克隆技术扩增野生型HPV 16E7基因,设计特异性引物对目的基因进行定点突变并构建表达质粒,转化进入原核表达体系并通过IPTG诱导表达,表达产物大小及纯度经十二烷基硫钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,免疫原性经蛋白免疫印迹法(Western blot)鉴定。结果准确按照设计突变目的基因特定位点,SDS-PAGE显示获得高纯度目的蛋白,Western blot结果显示目的蛋白具有良好的免疫原性。结论成功对HPV16E7进行定点突变并获得纯度较高免疫原性良好的突变表达蛋白。

• 单位
  广州中医药大学第一附属医院; 南方医科大学南方医院; 广东省中医院; 广州中医药大学第二附属医院