甘露聚糖结合凝集素对白假丝酵母菌感染鼠体内Treg/Th17细胞免疫平衡的调节作用

作者：王艳; 张卫斌; 杨泳慧; 陈晨; 杨婧文; 雷一鸣; 张伟; 王凡平; 王明永^*

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2019, (01).

• 甘露聚糖结合凝集素(MBL)
• MBL基因敲除小鼠(MBL－/－)
• 白假丝酵母菌(C.albicans)
• Th17细胞
• Treg细胞

目的 研究甘露聚糖结合凝集素(mannan-binding lectin,MBL)对白假丝酵母菌感染鼠体内Th17、Treg细胞分化的调节。方法 MBL基因敲除型(MBL－/－)和野生型(WT) C57BL/6小鼠分4组,2×107 CFU白假丝酵母菌(C.albicans)对感染组小鼠腹腔注射；感染3 d后取小鼠肝脏和肾脏病理切片,HE染色和PAS染色观察小鼠病理组织学变化；7 d后摘除小鼠眼球取静脉血流式细胞术分析小鼠体内Treg和Th17细胞；静脉抗凝血ELISA检测小鼠体内细胞因子IL-10和IL-17A的含量；颈椎脱臼处死小鼠后取脾脏细胞MACS磁性分选获得CD4＋ T细胞,提取总RNA,qRT-PCR检测其体内Foxp3、RORγt mRNA的表达；取小鼠脾脏CD4＋ T细胞,提取总蛋白,Western blot检测Foxp3、RORγt蛋白表达水平。结果 成功建立了C.albicans感染鼠模型,和WT感染组相比较：流式分析显示MBL－/－感染组小鼠体内Th17细胞亚型数目比例增高,Treg细胞亚型数目比例降低；ELISA结果显示MBL－/－感染组小鼠体内IL-17A水平明显增高,IL-10水平降低；qRT-PCR结果显示MBL－/－感染组小鼠体内转录因子RORγt mRNA表达升高,转录因子Foxp3 mRNA表达降低；Western blot印迹结果表明MBL－/－感染组小鼠体内RORγt蛋白表达量明显增多,而Foxp3蛋白表达量减少。结论 在C.albicans感染中,MBL促进了CD4＋T细胞向Treg细胞亚型诱导分化,抑制了CD4＋T细胞向Th17细胞亚型的诱导分化,从而调节了C.albicans感染鼠体内Treg/Th17细胞的免疫平衡。

• 单位
  基础医学院; 新乡医学院; 新乡医学院第三附属医院; 商丘医学高等专科学校