摘要
目的 研究低氧暴露诱导淋巴细胞数量减少与细胞增殖和凋亡的关系。方法 从C57BL/6小鼠脾中分离淋巴细胞,将淋巴细胞分别在低氧(1%O2)和常氧(21%O2)环境中培养12、24、48 h。用流式细胞术检测T、B淋巴细胞数量;羧基荧光素乙酰乙酸和AnnexinⅤ-FITC/PI方法分别检测淋巴细胞的增殖和凋亡;扫描电镜观察淋巴细胞形态;实时荧光定量逆转录PCR和Western blot检测凋亡相关因子鼠源B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2同源拮抗剂-杀伤蛋白(Bak)和胱天蛋白酶-3(caspase-3)的mRNA和蛋白表达水平。结果 低氧暴露12、24、48 h,可降低T、B淋巴细胞数量,抑制淋巴细胞增殖,促进细胞凋亡;扫描电镜观察显示,同一时间下,低氧组淋巴细胞更早出现凋亡特征形态学变化;低氧暴露12、24、48 h,淋巴细胞Bak和caspase-3的mRNA和蛋白表达水平均上调,而bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均下调。结论 低氧暴露通过抑制淋巴细胞增殖、促进凋亡,从而介导淋巴细胞数量下降。
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