OTUD3敲除对神经干细胞中缝隙连接蛋白43表达的影响

作者：徐同迎; 焦倩; 姜宏^*

来源：精准医学杂志, 2023, 38(02): 100-104.

DOI：10.13362/j.jpmed.202302002

• 神经干细胞
• 连接蛋白43
• 去泛素酶类
• 小鼠,基因敲除
• 细胞周期
• 细胞增殖

目的 探讨OTUD3敲除对神经干细胞(NSCs)中缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法 分离提取妊娠第14天时野生型(WT)和OTUD3-/-胚胎小鼠的脑皮质组织蛋白，同时进行体外培养WT-NSCs和OTUD3-/--NSCs,并根据细胞状态传代，传代至第3代时，应用倒置显微镜观察第1、3天时OTUD3-/--NSCs和WT-NSCs生长状态。用细胞免疫荧光染色检测WT-NSCs和OTUD3-/--NSCs中Ki67、Nestin和β-tubulinⅢ的表达情况，应用Western blotting方法检测WT-NSCs和OTUD3-/--NSCs中以及WT和OTUD3-/-胚胎小鼠脑皮质组织中OTUD3和Cx43表达变化情况。结果 培养并传代至第3代的WT-NSCs和OTUD3-/--NSCs生长状态良好，细胞免疫荧光染色显示Ki67、Nestin和β-tubulinⅢ染色阳性。与WT-NSCs相比，OTUD3-/--NSCs中OTUD3和Cx43表达量显著下调(t=16.82、3.21,P<0.05);与WT胚胎小鼠相比，OTUD3-/-胚胎小鼠脑皮质组织中OTUD3和Cx43表达量显著下调(t=10.04、20.41,P<0.05)。结论 OTUD3敲除后，NSCs中Cx43表达量显著下调，Cx43可能在促进NSCs的增殖和神经发育过程中发挥调节作用。

• 单位
  青岛大学; 基础医学院