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摘要
目的探讨番茄红素联合人尿液干细胞移植对肾病综合征大鼠肾损伤的影响及可能作用机制。方法体外复苏培养人尿液干细胞并对干细胞行CM-Dil标记。选取50只SD大鼠,随机分为正常组、模型组、番茄红素组、干细胞组、番茄红素联合干细胞组,每组10只。除正常组外,其余组大鼠均经由静脉注射阿霉素建立肾脏损伤病理模型。建模后番茄红素组大鼠给予番茄红素20 mg/kg灌胃8周,干细胞组大鼠给予20μL CM-Dil标记的人尿液干细胞尾静脉注射3 d,番茄红素联合干细胞组大鼠给予20μL CM-Dil标记的人尿液干细胞尾静脉注射3 d和番茄红素20 mg/kg灌胃8周,模型组大鼠给予L-DMEM尾静脉注射3 d和生理盐水灌胃8周。实验结束后采用三氯乙酸法测定各组大鼠24 h尿蛋白定量,利用全自动生化分析仪检测血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平,光镜下观察各组大鼠肾脏组织的病理学变化,荧光显微镜观测CM-Dil标记的人尿液干细胞存活及分布情况,通过RT-PCR和Western blot法分别检测各组大鼠肾脏组织中TGF-β/Smad信号通路mRNA和蛋白的相对表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠的24 h尿蛋白定量及血清TC、TG、LDL-C、Cr、BUN水平均明显升高(P均<0.05),血清TP、ALB、HDL-C水平均明显降低(P均<0.05);与模型组比较,番茄红素组、干细胞组、番茄红素联合干细胞组大鼠24 h尿蛋白定量及血清TC、TG、LDL-C、Cr、BUN水平均明显降低(P均<0.05),血清TP、ALB、HDL-C水平均明显升高(P均<0.05),且番茄红素联合干细胞组各项指标改善情况均明显优于番茄红素组和干细胞组(P均<0.05)。番茄红素联合干细胞组大鼠肾脏组织病理损伤明显轻于番茄红素组和干细胞组;模型组及番茄红素组未见CM-Dil标记的阳性细胞,番茄红素联合干细胞组CM-Dil标记的阳性细胞数明显多于干细胞组。与正常组比较,模型组大鼠肾脏组织中TGF-β1及Smad2、Smad3 mRNA和蛋白相对表达水平均明显升高(P均<0.05);与模型组比较,番茄红素组、干细胞组、番茄红素联合干细胞组大鼠肾脏组织中TGF-β1及Smad2、Smad3 mRNA和蛋白相对表达水平均明显降低(P均<0.05),且番茄红素联合干细胞组各项指标均明显低于番茄红素组和干细胞组(P均<0.05)。结论番茄红素联合人尿液干细胞移植能够显著改善肾病综合征大鼠的肾功能,减轻肾损伤,可能与调控TGF-β/Smad信号通路有关。
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