siRNA沉默AFP基因对肝癌细胞系EGHC-9901增殖的影响

作者：贺涛; 崔宏; 王云检; 黄长山; 黄涛; 韩风; 张玲

来源：基础医学与临床, 2011, 31(08): 884-888.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2011.08.021

• 甲胎蛋白
• 原发性肝癌
• 细胞增殖

目的建立稳定表达AFP-siRNA质粒的肝癌细胞系并探讨对其增殖的影响。方法构建AFP-siRNA,用脂质体法转染肝癌细胞系,G418筛选4～5周,Western blot及RT-PCR检测靶基因表达,分组:实验组、转染AFP-siRNA组;阳性对照组、转染空载体组;空白对照组、未处理组。MTT绘制生长曲线,平板克隆实验观察集落形成,流式细胞仪分析细胞周期。结果成功建立稳定表达AFP-siRNA的肝癌细胞系,实验组表达AFP近乎完全抑制;实验组增殖能力显著低于空载体组;实验组>75μm集落形成数19±2,低于空载体组62±6;实验组G1期细胞数较空载体组提高20%左右。结论成功建立稳定表达AFP-siRNA的肝癌细胞系,抑制AFP表达可使肝癌细胞发生G1期阻滞,明显抑制其增殖及集落形成能力。

• 单位
  河南省肿瘤医院