miR-210诱导犬BMSCs成血管及成骨向分化的体外实验研究

作者：王默涵; 邹多宏; 周咏; 吴轶群; 朱艳秋; 何家才

来源：安徽医科大学学报, 2016, 51(09): 1258-1262.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2016.09.006

• miR-210
• 骨髓间充质干细胞
• 基因转染
• 血管生成
• 骨形成

目的体外检测miR-210基因诱导犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨和成血管方向分化的作用,探讨目的基因双重调控作用。方法构建慢病毒载体Lenti-miR-210和Lenti-Lac Z,并分别用Lenti-Lac Z和Lenti-miR-210转染BMSCs。分别在目的基因转染BMSCs的第0、1、4、7、14、21天提取mRNA和蛋白,利用RT-PCR和Western blot检测关键性成血管和成骨因子[血管内皮生长因子(VEGF)和核心结合因子2(Runx2)]的表达。同时在目的基因转染的第21天通过碱性磷酸酶(ALP)和钙结节茜素红染色观察体外骨形成的情况。结果慢病毒载体Lenti-miR-210和Lenti-Lac Z能够成功转入BMSCs中,并在目的基因转染后,miR-210能够显著上调BMSCs关键性成骨和成血管因子VEGF和Runx2的表达(P<0.05);碱性磷酸酶和茜素红染色显示,相对于BMSCs组和Lenti-LacZ组,Lenti-miR-210组能够明显促进BMSCs的成骨向分化。结论 miR-210可以显著促进BMSCs向成骨和成血管方向分化,这为将来的体内实验奠定了基础。

• 单位
  上海交通大学医学院附属第九人民医院; 安徽医科大学附属口腔医院; 中心实验室; 安徽医科大学