摘要
wbkD基因在布鲁菌中编码一种糖基转移酶,参与合成布鲁菌LPS的O侧链。为探究wbkD基因与布鲁菌LPS合成和毒力之间的关系,本研究利用同源重组技术构建猪种布鲁菌wbkD基因缺失株。通过吖啶黄凝集试验、结晶紫染色、细菌LPS银染分析比较亲本株和缺失株之间LPS合成能力的差异,并利用小鼠巨噬细胞感染试验和小鼠感染模型,分析wbkD基因缺失对细菌毒力的影响。结果显示,wbkD基因缺失导致布鲁菌由光滑表型转变为粗糙表型,感染后48 h和72 h,?wbkD的细胞内存活能力显著弱于亲本株(P<0.001),小鼠感染试验进一步证实,在相同的感染剂量下,感染后1周和4周?wbkD在小鼠脾脏和肝脏载菌量均显著低于亲本株(P<0.001)。wbkD基因是布鲁菌合成LPS过程中的关键基因,wbkD基因缺失导致布鲁菌毒力致弱,本研究可为进一步筛选布病疫苗分子修饰靶点提供参考。
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单位中国兽医药品监察所; 华南农业大学; 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司