琼脂糖凝胶电泳与核酸印迹杂交法检测细菌毒力基因PCR产物的灵敏度比较研究

作者：綦廷娜; 刘志广; 王涛; 李培京; 叶长芸

来源：疾病监测, 2011, (08): 651-653.

• 核酸印迹杂交
• 琼脂糖凝胶电泳
• 肠出血性大肠埃希菌O157∶H7
• 猪链球菌2型
• stx2基因
• cps2J基因
• 检测灵敏度 nucleic acid blot hybridization
• agarose gel electrophoresis
• Enterohemorrhagic E.coli O157∶H7(EHECO157∶ H7)
• Streptococcus suis serotype 2
• stx2 gene
• cps2J gene
• detection limit

目的探讨核酸印迹杂交法在检测细菌毒力基因方面的应用价值。方法分别以10倍连续稀释的O157∶H7肠出血性大肠埃希菌和血清2型猪链球菌染色体提取物为模板,与志贺毒素2基因(stx2)和荚膜多糖2J基因(cps2J)特异性引物进行聚合酶链式反应(PCR)。用1%琼脂糖凝胶电泳及核酸印迹杂交法检测PCR产物,比较两种方法的最低检测限。结果 1%琼脂糖凝胶电泳对EDL933菌株stx2基因PCR产物的最低检测限为6.7×102cfu(56.87 pg)/PCR体系,对SC84菌株cps2J基因PCR产物的最低检测限为4.3×102 cfu(12.65 pg)/PCR体系;核酸印迹杂交法对EDL933菌...

• 单位
  中国疾病预防控制中心传染病预防控制所; 贵州医科大学; 传染病预防控制国家重点实验室