鼻咽癌放射抵抗细胞株的建立与鉴定

作者：严振宇; 曹祥; 葛宜枝; 宗丹; 何侠^*

来源：中华放射肿瘤学杂志, 2023, 32(12).

• 鼻咽肿瘤
• 放射抵抗
• 辐射抗性

目的体外构建鼻咽癌放射抵抗细胞株, 为进一步研究鼻咽癌放射抵抗的分子机制提供实验基础。方法采用剂量梯度法照射诱导建立放射抵抗细胞模型5-8F-IR。光学显微镜观察细胞形态变化;克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;CCK-8实验检测细胞活力;5-溴-2-脱氧尿嘧啶(EdU)实验检测细胞增殖能力;彗星实验及免疫荧光实验检测细胞DNA损伤修复能力;流式细胞术检测细胞凋亡水平及周期分布;蛋白质印迹法检测DNA损伤相关蛋白γH2AX及凋亡相关蛋白胱天蛋白酶3(Caspase-3)的蛋白表达水平。结果剂量梯度照射后5-8F-IR细胞形态较亲本5-8F细胞形态变长, 5-8F-IR细胞的克隆形成能力(P<0.01)、细胞活力(P<0.001)、细胞增殖能力(P<0.05)、DNA损伤修复能力(P<0.05)均明显优于亲本细胞5-8F, 照射后5-8F-IR细胞的凋亡率明显低于5-8F细胞(P<0.01), 未接受照射时5-8F-IR细胞处于S期的百分比较5-8F细胞升高, 接受照射后5-8F-IR细胞出现明显的G2/M期阻滞(P<0.01), 同时照射后5-8F-IR细胞的DNA损伤相关蛋白γH2AX(P<0.001)及凋亡相关蛋白Caspase-3(P<0.05)蛋白表达水平明显低于5-8F细胞。结论人鼻咽癌细胞株5-8F经剂量梯度法照射诱导建立的5-8F-IR细胞具有放射抗拒性并显示出与亲代5-8F细胞不同的生物学特性, 为探索鼻咽癌放射抵抗机制提供了研究工具。

• 单位
  南京医科大学; 江苏省肿瘤防治研究所; 江苏省肿瘤医院