替普瑞酮对百草枯诱导的SH-SY5Y细胞TDP43蛋白异常聚集抑制作用的研究

作者：崔宝龙; 何晓燕; 姚鲁清; 赵芳; 周畅^*

来源：精准医学杂志, 2020, 35(03): 217-221.

DOI：10.13362/j.jpmed.202003008

• 替普瑞酮
• 百草枯
• 细胞系,肿瘤
• DNA结合蛋白质类
• SH-SY5Y细胞
• 氧化性应激
• 自噬

目的探讨替普瑞酮(GGA)对百草枯(PQ)诱导的SH-SY5Y氧化应激模型细胞中TAR DNA/RNA结合蛋白43(TDP43)蛋白异常聚集的影响及其相关机制。方法将SH-SY5Y细胞分为无任何处理组(A组),以100μmol/L的GGA处理SH-SY5Y细胞24 h组(B组),分别以0、20、50、100μmol/L的GGA处理氧化应激模型细胞24 h组(C～F组)。分别用MTT比色法、流式细胞仪与免疫印迹法(Western blot)检测各组SH-SY5Y细胞的存活率、凋亡率、TDP43蛋白表达水平、P62蛋白表达水平及LC3BⅡ/Ⅰ比值。为观察GGA对TDP43蛋白表达水平影响是否通过自噬发挥作用,将SH-SY5Y细胞分为无任何处理组(A组),分别以0、50、50μmol/L的GGA处理氧化应激模型细胞24 h组(G～I组),其中I组用5 mmol/L的3-MA阻断自噬,利用Western blot检测各组SH-SY5Y细胞TDP43蛋白表达水平和LC3BⅡ/Ⅰ比值。结果 A～F组SH-SY5Y细胞的存活率、凋亡率、TDP43蛋白表达水平、P62蛋白表达水平及LC3BⅡ/Ⅰ比值比较差异有显著性(F=37.57～231.50,P<0.01);其中D、E、F组的细胞存活率、凋亡率、TDP43、P62蛋白表达水平与LC3BⅡ/Ⅰ比值与C组比较差异均有显著性(q=3.01～22.23,P<0.01)。3-MA阻断自噬后,A、G～I组TDP43蛋白表达水平与LC3BⅡ/Ⅰ比值比较差异有显著性(F=40.40,66.68,P<0.01);其中I组与H组TDP43蛋白表达水平比较差异有显著意义(q=6.12,P<0.01)。结论GGA能够通过增强自噬降低PQ诱导的SH-SY5Y氧化应激模型细胞中TDP43蛋白的表达水平。

• 单位
  青岛大学附属医院; 神经内科