摘要
目的:探究ETF在乳腺癌组织中的表达以及对乳腺癌细胞增殖的影响。方法:收集沈阳市积水潭医院普外科2018年1月至2020年12月经病理组织学确诊的76例乳腺癌患者癌组织和癌旁组织,采用免疫组化技术、实时荧光定量PCR(RT-q PCR)、Western blot法检测ETF在乳腺癌及癌旁组织中的表达,同时检测其在人正常乳腺细胞MCF10A、人乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7中的表达。通过慢病毒载体构建过表达ETF的细胞株MDA-MB-231-ETF/MCF-7-ETF和其阴性对照组稳转细胞株MDA-MB-231-NC/MCF-7-NC,采用CCK-8实验检测细胞增殖; Annexin V-FITC/PI染色检测细胞周期,RT-q PCR、Western blot检测周期相关蛋白表达情况。结果:ETF蛋白在乳腺癌组织中阳性表达率为73.68%(56/76),高于在癌旁组织中阳性表达率[17.11%(13/76)](P<0.01);乳腺癌组织中ETF m RNA和蛋白表达水平显著高于癌旁正常组织(P<0.01)。MDA-MB-231和MCF-7细胞中ETF m RNA和蛋白表达水平显著高于MCF10A细胞(P<0.01)。与阴性对照组和空白对照组比较,MDA-MB-231-ETF/MCF-7-ETF组细胞在48、72、96 h处细胞增殖显著提高(P<0.01);细胞周期中G2/M期细胞比例显著上升,细胞周期进程加快(P<0.01)。MDA-MB-231-ETF/MCF-7-ETF组Cyclin D1、CDK4、CDK6、Cyclin E1 m RNA和蛋白表达均显著高于阴性对照组和空白对照组(P<0.01),RB m RNA和蛋白水平与阴性对照组与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),其磷酸化水平显著高于阴性对照组和空白对照组(P<0.01)。结论:ETF在乳腺癌组织和细胞中高表达,通过调控细胞周期和相关蛋白表达促进乳腺癌细胞增殖。
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单位基础医学院; 沈阳医学院; 北京积水潭医院