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摘要
目的探讨Nec-1对于环孢素A导致的细胞毒性的保护作用及其潜在的分子机制。方法以Nec-1和环孢素A共同作用于小鼠肾小管上皮细胞株MRTEpi C、肾小球内皮细胞MGEC、肾小球系膜细胞株MMC,然后采用MTT法、软琼脂克隆形成实验分别检测细胞的生长曲线变化、克隆形成能力。采用流式细胞术检测细胞凋亡。采用Western blot检测细胞周期蛋白Cyclin D1、CDK4、CDK2、Cyclin E和细胞凋亡相关Caspase3。结果环孢素A作用后,细胞生长能力明显下降,克隆形成能力明显降低,具有统计学意义(P<0.05)。细胞周期相关蛋白Cyclin D1、CDK4、CDK2、Cyclin E显著升高(P<0.05),细胞凋亡的比例和Caspase 3的表达无变化。结论 Nec-1通过上调细胞周期相关蛋白Cyclin D1、CDK4、CDK2、Cyclin E对肾小球和肾小管细胞产生细胞毒性作用,而Nec-1具有保护作用。
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