人羊膜间充质干细胞旁分泌对成骨细胞的影响

作者：王贵玲; 洪滔; 淦岷; 仇丽鸿^*

来源：口腔医学, 2021, 41(01): 23-26.

DOI：10.13591/j.cnki.kqyx.2021.01.005

• 人羊膜间充质干细胞
• 成骨细胞
• 条件培养基
• 旁分泌

目的探究人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells, hAMSCs)旁分泌对人成骨细胞生物活性的影响。方法酶消化法提取原代hAMSCs,并检测细胞表面标记物表达。收取hAMSCs 24 h培养上清与新鲜培养液1∶1配比作为条件培养基(condition medium,hAMSC-CM),以新鲜培养液作为阴性对照,作用于人成骨样细胞系MG63,观察对细胞生物活性的影响。MTT法检测连续1～4 d细胞增殖情况;Transwell小室测定细胞2.5 h迁移情况,苏木素-伊红染色后拍照计数;对硝基苯磷酸二钠(pNPP)法检测培养5 d后细胞内ALP表达。结果 hAMSCs呈典型的成纤维样细胞形态,细胞表面阳性表达CD29、CD105、CD49d、CD44;阴性表达CD34、CD45、CD31和HLADR。hAMSC-CM在第1～3天均可显著促进MG63增殖(P<0.05);hAMSC-CM显著增强MG63迁移能力(P<0.05);hAMSC-CM培养组细胞中ALP表达显著强于对照组(P<0.05)。结论 hAMSCs可通过CM介导的旁分泌作用增强成骨细胞生物活性。

• 单位
  杭州市第一人民医院; 杭州市红十字会医院; 浙江大学; 中国医科大学