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摘要
目的研究半枝莲和白花蛇舌草药对中总黄酮富集的工艺条件及体外抗氧化和抑菌作用。方法以总黄酮的含量、收率为考察指标,筛选D101型大孔吸附树脂富集药对中总黄酮的吸附和洗脱参数,采用DPPH法及FRAP法来评价药对中总黄酮的抗氧化活性。采用"双层平板打孔法"评价药对中总黄酮对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用,二倍稀释法测定总黄酮的最低抑菌浓度(MIC),通过绘制生长曲线、测定菌体胞内蛋白的泄漏初步探讨其抑菌机制。结果 D101型大孔吸附树脂富集的工艺条件为:7 BV上样液(总黄酮浓度为2.52 mg·mL-1)以1.0 mL·min-1速度进行吸附,用5.8 BV纯化水洗脱,10 BV 81%乙醇以3 mL·min-1速度洗脱,药对中总黄酮的平均含量可达26.40%;与富集前比较,含量提高了将近3倍。抗氧化作用表明:富集黄酮的IC50为26.7μg·mL-1,粗黄酮的IC50为69.7μg·mL-1,对DPPH均有良好的清除作用,富集黄酮和粗黄酮的FRAP值较高,都具有良好的总抗氧化能力。抑菌作用表明:药对中总黄酮对金黄色葡萄球菌有抑制作用,对大肠杆菌无明显的抑制作用。粗黄酮、富集黄酮对金黄色葡萄球菌的MIC均为3.75 mg·mL-1。药对中总黄酮可能是通过破坏细胞壁或膜的结构,导致细胞膜通透性增加,从而影响细菌正常的生长和繁殖。结论富集总黄酮的工艺条件简单、可行,药对中总黄酮具有一定的抗氧化及抑菌作用,且均呈浓度依赖关系。
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