摘要

目的探究高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)测定欧前胡素对罗丹明123(Rho123)含量的影响。方法确定色谱条件为色谱柱为petruim C18柱,柱温为40℃,所用流动相为乙腈-1%的三乙胺,发射波长为546 nm,激发波长为485 nm。所用材料为本院保存的卵巢癌细胞株、卵巢癌耐紫杉醇的细胞株、欧前胡素及Rho123对照品。结果构建标准曲线Y=1.1987X-4.0045,R2=0.999 8,Rho123质量浓度达3.516~600 ng/mL,获取Rho123定量下限是1.172 ng/mL,检测下限为0.366 ng/mL。经考察,方法具有良好的专属性,保留时间为9.92 min左右,其分离度、特异度均良好。本测定方法Rho123日内精密度1.4%~4.9%,日间精密度2.8%~7.4%,不同浓度的样品回收率存在差异,且样品具有良好的稳定性。经检测,与卵巢癌细胞株比较,卵巢癌耐紫杉醇的细胞株内Rho123的含量下降,而加入欧前胡素的耐药细胞株中,其蓄积情况发生变化,且随欧前胡素浓度升高,Rho123蓄积倍数逐渐升高。结论 HPLC-FLD专属性较强,操作简便,结果稳定。在耐药卵巢癌细胞中,欧前胡素对Rho123含量有明显影响,随着欧前胡素浓度升高,Rho123被排出的可能性越低,应用欧前胡素,可改善卵巢癌细胞的耐药性问题。