摘要
目的:探讨长期大强度运动对大鼠腓肠肌蛋白质组表达的影响,揭示骨骼肌适应性应答的分子机制。方法:SD大鼠随机分为安静对照组与运动训练组。对照组大鼠不给予任何干预,运动训练组进行递增负荷跑台训练(30 min/天, 6天/周)。分别于第2、4和6周末,腹主动脉采血收集血清,测定肌酸激酶(creatine kinase, CK)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)活性;第6周末,取大鼠腓肠肌,提取与纯化总蛋白,双向凝胶电泳分离蛋白质,经染色及图像分析,对差异表达显著的蛋白质点进行质谱分析与蛋白质数据库检索。结果:与对照组相比,运动2周组大鼠血清CK浓度显著升高(P<0.05),运动4周组和运动6周组无明显变化(P>0.05);运动2周组、运动4周组和运动6周组大鼠血清LDH水平均无显著变化(P>0.05);与对照组相比,6周递增负荷运动组大鼠腓肠肌有36个蛋白质斑点差异表达1.5倍以上,选取9个目标蛋白质点进行质谱鉴定,其中5-羟色胺受体2B (5-hydroxytryptamine receptor 2B, 5-HTR2B)、丙酮酸脱氢酶El元件亚基α(pyruvate dehydrogenase E1 component subunit alpha, PDH-E1α)、蛋白酶体亚基-B4 (proteasome subunit beta type-4, PSMB4)、蛋白酶体亚基-B6 (proteasome subunit beta type-6, PSMB6)和蛋白酶体亚基-B7 (proteasome subunit beta type-7, PSMB7)表达显著下调,α-肌动蛋白(α-actin)、M型肌酸激酶(creatine kinase M-type, M-CK)、肌球蛋白轻链2 (myosin regulatory light chain 2, skeletal muscle isform, MLC2)表达显著上调,腺苷酸激酶同工酶1 (adenylate kinase isoenzyme 1, AK1)为新增蛋白质点。结论:6周递增负荷运动后大鼠腓肠肌蛋白质组表达发生显著变化,其中5-HTR2B与神经-肌肉兴奋性有关,PSMB4、PSMB6和PSMB7与骨骼肌蛋白质降解有关,α-actin和MLC2与骨骼肌收缩功能有关,PDH-E1α、M-CK和AK1与骨骼肌能量代谢和利用有关。
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