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摘要
目的 探究氨磷汀缓解顺铂肾毒性的分子机制。方法 在肾近端小管上皮细胞系HK-2及原代细胞中，采用CCK-8细胞活性实验检测氨磷汀对顺铂细胞毒性的抑制作用。通过在线数据库tabula-muris分析肾脏组织各细胞亚群PKM2的表达。通过流式细胞术检测细胞凋亡比例。通过荧光定量PCR和蛋白免疫印迹实验检测细胞中PKM2基因表达。通过小RNA干扰技术敲低细胞中PKM2基因表达。结果 氨磷汀显著增强HK-2细胞和原代肾近端小管上皮细胞抵抗顺铂的毒性。在顺铂处理的细胞中，随着氨磷汀浓度的增加，细胞的活力从0.37增加到0.45至0.77(P<0.001)。另外，随着氨磷汀浓度的增加，HK-2细胞中PKM2基因表达依次增加，在1μmol/L浓度时增加到8.76倍(P<0.001)。在HK-2细胞中干扰PKM2基因表达，氨磷汀对顺铂的细胞毒性的保护作用显著受到抑制。顺铂诱导的细胞凋亡比例、标志蛋白Cleaved-PARP和Cleaved-caspase3的表达被氨磷汀显著抑制。单细胞数据分析的结果表明，相对于肾脏组织其他细胞亚群，PKM2在肾近端小管上皮细胞中表达最低。结论 氨磷汀通过上调肾近端小管上皮细胞PKM2的表达抑制顺铂诱导的细胞凋亡，从而缓解顺铂的细胞毒性。
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