摘要
目的 研究siRNA对大鼠心肌H9C2细胞血管紧张素转换酶2(ACE2)的抑制作用.方法 根据大鼠ACE2基因序列设计并化学合成3条siRNA及1条阴性对照siRNA,并标记FAM荧光,以Lipofectamine 2000转染人大鼠心肌H9C2细胞,用Realtime Quantity RT-PCR和Western-blot分别检测ACE2基因和蛋白表达量的改变、验证所设计的siRNA的抑制效应.结果 以Lipofectamine 2000转染所设计的siRNA进入H9C2细胞,转染效率>95%.起始于434、567位点的siRNA在基因水平对ACE2无明显抑制效应(P>0.05);起始于1205位点的siRNA在基因和蛋白水平均有明显的抑制效应,基因水平下降73.5%(P<0.05);蛋白水平下降70.0%(P<0.01).结论 起始于1205位点的siRNA对大鼠心肌H9C2细胞ACE2有明显的抑制效应.
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单位上海交通大学医学院附属仁济医院; 中国科学院; 上海交通大学