甘珀酸抑制eATP-P2X7R-NLRP3信号通路减轻慢性胰腺炎纤维化的实验研究

作者：张桂贤; 王曼雪; 刘大卫; 刘洪斌^*; 聂卫; 石釧

来源：天津医药, 2020, 48(10): 942-908.

• 甘珀酸
• 胰腺炎,慢性
• 腺苷三磷酸
• 受体,嘌呤能P2X7
• NLR家族,热蛋白结构域包含蛋白3
• 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1
• 连接蛋白类
• 纤维化

目的探讨细胞外ATP(e ATP)-P2X7R-NLRP3信号通路在慢性胰腺炎(CP)胰腺纤维化中的作用以及ATP抑制剂甘珀酸(CBX)对CP的治疗作用。方法将6周龄雄性C57BL/6小鼠随机均分为5组:正常组,模型组,CBX低、中、高剂量组(分别为25、50、100 mg/kg)。造模结束后,CBX各剂量组小鼠分别腹腔注射相应剂量的药物。末次给药24 h后将小鼠脱颈处死。HE染色评估胰腺组织病理学改变;ATP化学发光法测定小鼠胰腺组织e ATP水平;免疫荧光染色检测P2X7R、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)蛋白表达;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(q PCR)检测P2X7R、NLRP3、Caspase-1、缝隙连接蛋白(PAN-1)m RNA的表达。结果 HE染色,光镜下可见正常组小鼠胰腺细胞分布紧密,排列规则,无纤维化及炎症细胞浸润。模型组细胞间隙增宽、腺泡萎缩、炎症细胞浸润且有大量胶原纤维生成,组织学评分较正常组显著升高(P<0.01);与模型组相比,CBX中、高剂量组炎症细胞浸润及胶原纤维生成均减少,组织学评分降低。模型组小鼠造模后e ATP水平较正常组显著升高(P<0.01),CBX中、高剂量组给药2周后,胰腺组织e ATP水平均低于模型组。免疫荧光染色法和q PCR检测均显示,与正常组相比,模型组P2X7R、NLRP3、Caspase-1蛋白和m RNA表达升高(P<0.01);与模型组相比,CBX中、高剂量组表达均下调(P<0.05)。此外,q PCR检测结果还显示,模型组小鼠PAN-1 m RNA表达较正常组显著上调;与模型组相比,CBX中、高剂量组表达均下调(P<0.01)。结论 CP病程中e ATP水平显著增加并激活P2X7R,促进NLRP3炎性体组装,加重胰腺纤维化,CBX可下调P2X7R、NLRP3、Caspase-1,减轻胰腺炎症损伤及纤维化,从而发挥治疗作用。

• 单位
  天津医科大学; 天津市医药科学研究所