肝癌特异性HSV-TK/CD基因表达质粒的构建及其杀伤活性

作者：黄嘉凌; 刘燕艳; 刘然义; 方壮伟; 申权; 黄文林; 吕明德

来源：中山大学学报(医学科学版), 2005, 26(02): 142-145.

DOI：10.3321/j.issn:1672-3554.2005.02.006

• 肝肿瘤
• 基因疗法
• 重组
• 自杀基因

【目的】构建肝癌特异性双自杀基因表达质粒。【方法】用平端连接方法将pUH-3质粒中822 bp的pALBeAFP片段(含有416 bp的白蛋白启动子pALB和406 bp的甲胎蛋白增强子eAFP)代替pCEA—CD/TK质粒的CEA启动子,用PCR法鉴定插入方向,构建肝癌特异性双自杀基因表达质粒pALBeAFP-CD/TK。将pALBeAFP-CD/TK转染HepG2等4种肝癌细胞,MTT法测定前药GCV、5-FC对HepG2细胞的杀伤作用。【结果】获得pALBeAFP—CD/TK克隆,RT-PCR证实HepG2细胞转染pALBeAFP-CD/TK后可表达自杀基因, pALBeAFP—CD/TK转染可使前药GCV、5-FC特异性地杀伤HepG2细胞。【结论】肝癌特异性HSV—TK/CD基因表达质粒构建成功。

• 单位
  中山大学肿瘤防治中心