幽门螺杆菌东、西方株CagA的结构差异及其基因表达研究

作者：张晓怡; 周建奖; 李雅洁; 赵艳; 陈学书; 龙妮娅; 王琴容; 谢渊^*

来源：中国病原生物学杂志, 2018, 13(10): 1067-1072.

DOI：10.13350/j.cjpb.181004

• 幽门螺杆菌
• 分离鉴定
• CagA
• 尿素酶

目的比较幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)东、西方株CagA蛋白的结构差异,探讨其致病性差异的原因。方法微需氧培养Hp东、西方株各3株,获取cagA全长序列,用DNA Star和MEGA6进行氨基酸序列和构成比对。PT-PCR和Western blot检测东、西方株中CagA和尿素酶及其基因的表达。RT-qPCR检测东、西方株中8个基因的表达并进行分析。结果成功培养并鉴定Hp临床株4株,3株为东方株,1株为西方株。序列比对分析东、西方株中CagA氨基酸全长序列有明显差异。丙氨酸、精氨酸和苏氨酸在东方株中显著高于西方株:分别为88和83(t=5.303,P=0.006)、32和25(t=3.528,P=0.025)、57和50(t=3.951,P=0.017);组氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、谷氨酰胺和缬氨酸在东方株显著低于西方株:分别为13和17(t=8.485,P=0.001)、137和147(t=11.72,P=0.000)、12和20(t=9.449,P=0.001)、59和63(t=4.472,P=0.011)、59和63(t=6.5,P=0.003)。尿素酶α基因在6株Hp中均有表达,但有2株Hp不表达CagA和尿素酶β。定量PCR结果显示,东方株尿素酶α基因、LPS合成蛋白基因及鞭毛钩蛋白FlgE基因高表达,而西方株中尿素酶辅助蛋白Ureh基因、鞭毛合成蛋白FlhA基因及膜蛋白基因高表达(P<0.05)。结论 Hp东、西方株在CagA结构及基因表达存在差异性,推测可能是Hp东方株致病性更强的原因之一。

• 单位
  贵州医科大学