基于非洲猪瘟病毒标准物质的荧光PCR检测试剂盒初步评价

作者：马龙; 尹才; 李莉; 李杰; 王晓亮; 李知新

来源：中国动物检疫, 2021, 38(04): 108-111.

• 非洲猪瘟病毒
• 标准物质
• 荧光PCR检测试剂盒
• 比对

为探究非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）标准物质作为试剂盒评价体系的可行性,比较了市场上5种主流品牌ASFV荧光PCR检测试剂盒的检测性能。使用ASFV P72基因核酸标准物质作为模板,根据5种试剂盒说明书分别进行相应的荧光定量PCR检测,结合扩增曲线、Ct值,分析不同试剂盒的敏感性、可重复性以及所需反应时间。结果显示:5种试剂盒的阴性、阳性对照均成立,最低检测限均为5.9×10-1拷贝/μL;4个厂家的试剂盒线性关系R2> 0.98,其中最优的R2=0.994,离散度最小;各试剂盒的实际反应耗时与理论反应耗时均有一定差异（0.20～0.96 h）。结果表明,各生产厂家使用P72基因作为靶基因研制的ASFV荧光PCR检测试剂盒都可以使用ASFV标准物质作为评价体系,来评判试剂盒的检测性能。本试验为各实验室不同样品检测的ASFV荧光PCR检测试剂盒选择提供了一种可用的评价方法。