鸡斑联蛋白基因的慢病毒干扰载体的构建及筛选

作者：戴国俊; 孙大辉; 林雨鑫; 孙明明; 王翔; 王金玉; 张跟喜; 谢恺舟; 施会强; 侍苗苗

来源：畜牧兽医学报, 2013, (08): 1330-1336.

• zyxin基因
• RNAi
• 慢病毒干扰载体
• 真核表达载体
• 鸡 zyxin
• RNAi
• recombinant lenti-virus interference vectors
• eukaryotic expression vector
• chicken

本试验旨在构建4条鸡斑联蛋白(zyxin)基因的RNAi慢病毒载体,对其进行滴度测定,并进行有效干扰靶点的筛选,为以后开展鸡zyxin基因抗球虫机理的研究奠定基础。提取鸡胸腺组织的RNA,反转录,扩增zyxin基因的编码区,并将其克隆到真核表达载体Pex-6上。设计针对zyxin的shRNA序列,应用基因重组技术插入到Lv3慢病毒表达载体中,将lv3-shRNA载体与包装质粒pGag/Pol、pRev、Pvsv-G共转染293T细胞,进行病毒包装。将得到的病毒原液10倍稀释6个梯度,分别转染293T细胞,进行滴度的测定。将构建好的4条慢病毒载体与Pex-6-zyxin真核表达载体共转染293T...

• 单位
  扬州大学