CXCR4-shRNA重组腺病毒表达载体的构建及鉴定

作者：陆航; 孙巨峰; 刘学政

来源：山东医药, 2011, (46): 22-23.

• CXC趋化因子受体4
• RNA干扰
• 重组腺病毒载体
• 人胚肾293A细胞 CXC chemokine receptor type 4
• RNA interference
• recombinant adenovirus vector
• human embryo kidney 293A cell

目的选择性构建CXC趋化因子受体4(CXCR4)的特异RNA干扰载体。方法在GenBank中获取CXCR4基因的核苷酸序列,设计并合成3条短发夹RNA(shRNA)的DNA序列,并克隆到PL-Dest腺病毒骨架载体(shpAd/PL-Dest)中,组成人趋化因子受体重组腺病毒基因沉默子(shpAd-hCXCR4-eGFP),采用酶切、PCR和DNA测序方法验证。将验证后3种沉默子经酶切后转染至HEK293A细胞包装病毒,得到CXCR4的腺病毒表达载体。结果构建的shRNA-Ad-hCXCR4-eGFP 3种基因沉默子序列正确并成功克隆到腺病毒表达载体上。结论成功构建CXCR4-shRNA腺病毒...

• 单位
  辽宁医学院附属第一医院; 广西医科大学