迷迭香酸甲酯通过抑制Akt/mTOR信号通路诱导人肝癌细胞凋亡

作者：鲜瑶; 江伟; 刘润坤; 涂康生; 高士杰; 王军; 张雷^*

来源：西安交通大学学报（医学版）, 2023, 44(05): 802-808.

• 迷迭香酸甲酯
• 原发性肝癌
• 增殖
• 迁移
• 凋亡
• Akt/mTOR通路

目的 探讨迷迭香酸甲酯(methyl rosmarinate, MR)诱导人肝癌细胞(HCC)Hep-3B、SK-Hep1凋亡的作用及其机制。方法 CCK-8法检测各浓度MR(0～200μmol/L)对Hep-3B、SK-Hep1、MIHA细胞的增殖-毒性作用；光学显微镜观察不同浓度MR处理三种细胞后的形态变化；EdU实验及流式细胞术分别检测Hep-3B、SK-Hep1细胞增殖及凋亡情况；Transwell迁移和侵袭实验检测MR对Hep-3B、SK-Hep1细胞迁移与侵袭能力的影响；Western blotting检测凋亡、上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)及Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达情况。结果 不同浓度MR(0～200μmol/L)处理Hep-3B、SK-Hep1细胞48 h,其细胞活性呈浓度依赖性显著降低(P<0.01),而对MIHA细胞活性无显著影响(P>0.05),Hep-3B、SK-Hep1细胞MR的IC50分别为102.5μmol/L和99.3μmol/L。MR(0～150μmol/L)处理后显著抑制Hep-3B、SK-Hep1细胞增殖(P<0.05),通过光学显微镜观察到Hep-3B、SK-Hep1贴壁细胞死亡脱落和细胞外形凹陷萎缩，而MIHA细胞形态无明显改变。与对照组相比，100、150μmol/L MR诱导Hep-3B、SK-Hep1细胞凋亡，凋亡蛋白Bax和cleaved PARP的表达显著增加(P<0.05),而抗凋亡蛋白Bcl-2的表达显著下降(P<0.05);且HCC细胞的迁移和侵袭均被抑制，E-cadherin的表达显著增加，N-cadherin和Vimentin的表达降低(P<0.05)。Western blotting检测结果显示，经MR处理的Hep-3B和SK-Hep1的p-Akt和p-mTOR的表达显著降低且呈剂量依赖性，这提示MR可能通过抑制Akt/mTOR信号通路发挥抗癌作用。结论 MR促进Hep-3B、SK-Hep1细胞凋亡，其作用机制可能与抑制Akt/mTOR信号通路有关。

• 单位
  西安交通大学第一附属医院; 邵阳学院