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摘要
目的探求汉防己甲素对小鼠内皮瘤细胞系EOMA细胞的影响及其分子机制。方法采用MTT方法考察汉防己甲素在时间和浓度上对EOMA细胞的影响;使用流式细胞术检测汉防己甲素处理后的EOMA细胞内各个不同细胞周期内的含量,推测汉防己甲素对EOMA细胞的G1/S期检验点的影响;Western blot方法分析汉防己甲素引起EOMA细胞阻滞的分子机制,并用流式细胞术检测细胞内活性氧水平,用活性氧清除剂NAC预处理细胞后再进行药物孵育测定。结果汉防己甲素能够有效抑制此细胞的增殖,随着浓度增加时间延长,细胞增殖率下降;在汉防己甲素20μM时作用48 h后便有显著的抑制作用。汉防己甲素对EOMA细胞周期中G1/S期的细胞阻滞和升高细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、上调AKT,GSK-3β以及p53等上游蛋白水平,从而使细胞周期阻滞,使周期蛋白的表达发生变化。而ROS的抑制剂NAC可以明显地抑制EOMA细胞周期因子的调控。结论汉防己甲素可以抑制肿瘤血管新生,为后续研究将汉防己甲素作为临床抗癌药物提供了理论依据。
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单位山东省医学科学院; 河南省肿瘤医院
