珍稀濒危植物大果木莲ISSR-PCR反应体系的建立

作者：毛云玲; 陈少瑜; 韩燕; 吴涛; 司马永康; 郝佳波; 付玉嫔

来源：安徽农业科学, 2009, 37(31): 15163-15166.

DOI：10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.31.141

• 珍稀濒危植物
• 大果木莲
• 基因组DNA
• ISSR-PCR反应体系 Rare and endangered plants
• Manglietia grandis Hu et Cheng
• Genomic DNA
• ISSR-PCR reaction system

[目的]建立高效稳定的大果木莲ISSR-PCR反应体系。[方法]以珍稀濒危植物大果木莲新鲜嫩叶为材料,在高盐沉淀法提取高质量基因组DNA的基础上,通过ISSR-PCR反应体系中5个主要因素的单因子梯度试验,优化并最终建立了大果木莲稳定而高效的ISSR-PCR反应体系和反应程序。[结果]试验建立的大果木莲的ISSR-PCR反应体系为:20.0μl反应体系中含10×buffer2.0μl、Mg2+2.0 mmol/L、Taq酶0.5 U、DNA模板40 ng、引物0.8μmol/L、dNTPs0.2 mmol/L和ddH2O13.3μl,其反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,...

• 单位
  云南省林业科学院; 西南林学院