利用CRISPR/Cas9技术敲除LSD1基因显著抑制人慢性髓系白血病K562细胞的增殖与CD235a的表达

作者:高洁; 任思蕊; 王冰蕊; 郭青; 冯甜甜; 王鼎; 刘金花; 佟静媛; 石莉红
来源:中国实验血液学杂志, 2017, 25(05): 1327-1333.
DOI:10.7534/j.issn.1009-2137.2017.05.009

摘要

目的:探索敲除LSD1基因对人慢性髓系白血病K562细胞产生的影响。方法:利用CRISPR/Cas9技术特异性敲除K562细胞系的LSD1基因;通过流式细胞分选技术获得单细胞后,经过扩增培养、Western blot与测序鉴定,分别获得1株LSD1+/-与LSD1-/-细胞株;MTS方法检测LSD1敲除对K562细胞增殖的影响;流式细胞分析技术检测LSD1对K562细胞表面标记表达的影响。结果:成功构建了K562的LSD1+/-与LSD1-/-细胞株;LSD1的敲除显著抑制了K562的增殖及CD235a的表达。结论:LSD1基因对K562细胞的增殖及CD235a的表达具有关键调控作用。

  • 单位
    中国医学科学院北京协和医学院; 实验血液学国家重点实验室

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