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摘要
目的:探讨人早孕蜕膜间充质干细胞(hDMSCs)治疗大鼠宫腔粘连(IUA)的可行性和有效性。方法:体外分离、培养、纯化、鉴定h DMSCs。将30只雌性SD大鼠随机分为3组:蜕膜间充质干细胞治疗组(IUA+hDMSCs)、IUA模型组和假手术(sham)组,每组各10只。IUA+hDMSCs组和IUA组复制IUA模型后10 min内,IUA+hDMSCs组经尾静脉注射2×106个Dio标记的hDMSCs,每3天补充1次,连续注射3次;IUA组经尾静脉注射相同容量的PBS;sham组仅行开腹手术。3个动情周期后取子宫行HE染色和Masson染色,测量子宫内膜厚度、子宫内膜腺体数目、子宫内膜小血管数目和纤维化面积比率,并行免疫组化检测子宫内膜组织细胞角蛋白、波形蛋白、转化生长因子(TGF)-β1及整合素αγβ3的表达量,q PCR检测IUA相关基因含量,免疫荧光观察h DMSCs在内膜中的分布情况,并评估大鼠的生育能力。结果:IUA组部分子宫腔闭锁,内膜萎缩,腺体减少,大量纤维化改变。IUA+hDMSCs组与IUA组相比子宫间质厚度明显增加(P<0.05),大量腺体增生和小血管新生(P<0.05),纤维化程度减小(P<0.05),与sham组比较无统计学差异。IUA+hDMSCs组细胞角蛋白、波形蛋白和整合素αγβ3表达量明显高于IUA组(P<0.05),而TGF-β1表达量低于IUA组(P<0.05)。qPCR结果显示与IUA组相比,除TNF-α和结缔组织生长因子下调外,IUA+hDMSCs组的干细胞因子、血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和thrombospondin-1均明显上调。免疫荧光结果显示Dio- DMSCs主要分布于腔上皮层,部分位于间质。IUA+hDMSCs组大鼠双侧子宫均妊娠,平均胎鼠数量与IUA组相比有统计学差异(P<0.05)。结论:hDMSCs可在受损的大鼠子宫内膜中存活、增殖,有效修复大鼠的子宫内膜,抑制IUA。
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