ILK-siRNA-DNA表达载体的构建

作者：李敏侠; 刘必成; 张露; 张晓良

来源：东南大学学报(医学版), 2006, (06): 407-410.

DOI：10.3969/j.issn.1671-6264.2006.06.005

• 小干扰RNA
• 质粒
• 整合素连接激酶
• 构建

目的:构建针对整合素连接激酶(ILK)mRNA的小干扰RNA(siRNA)表达载体,为抑制ILK在哺乳动物细胞内表达、研究其功能奠定基础。方法:合成含靶向ILK基因siRNA转录模板的茎环结构,与两端分别有BamHⅠ、HindⅢ酶切位点的Psilencer 3.1质粒连接,大肠杆菌中扩增,测序鉴定。结果:转化大肠杆菌涂布平板长出阳性菌落,重组质粒电泳初步说明质粒构建成功,测序结果表明Psilencer 3.1酶切位点BamHⅠ、HindⅢ之间有64 bp的插入片段,其序列与所设计、合成的ILK-siRNA转录模板序列一致。结论:siRNA转录模板完整正确地插入Psilencer 3.1质粒中。

• 单位
  东南大学附属中大医院