戊二酸致原代培养纹状体神经元神经毒性的体外研究

作者：田凤艳; 宁琴; 罗小平

来源：实用儿科临床杂志, 2011, (08): 602-605+608.

DOI：10.3969/j.issn.1003-515X.2011.08.019

• 戊二酸血症Ⅰ型
• 原代培养
• 神经毒性 glutaric acidemia type Ⅰ
• primary culture
• neurotoxicity

目的探讨戊二酸(GA)干预体外培养纹状体神经元致神经元损伤的浓度和时间及其损伤机制。方法体外培养新生大鼠纹状体神经元,于体外培养7 d行神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫细胞化学染色鉴定神经元纯度。纯度达90%以上,用不同浓度GA(1~50 mmo·lL-1)孵育体外培养10 d的纹状体神经元24~96 h。倒置显微镜及赫斯特荧光染料33342(-/+)荧光活细胞染色后荧光显微镜观察神经元形态变化;四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法检测细胞线粒体功能变化;膜联蛋白-V碘/化丙啶双染流式细胞仪检测判断GA诱导纹状体神经元凋亡率及死亡率;实时定量反转录(RT)-PCR及Western blo...

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院