激光捕获显微切割联合SELDI蛋白质芯片筛选肺腺癌早期诊断标志蛋白

作者：田应选; 杨拴盈; 南岩东; 张潍; 余捷凯; 郑树

来源：四川大学学报（医学版）, 2009, 40(01): 157-161.

DOI：10.3969/j.issn.1672-173X.2009.01.038

• 激光捕获显微切割
• 表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱
• 蛋白质组学
• 肺腺癌
• 早期诊断

目的探讨应用激光显微切割(LCM)联合表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱蛋白质芯片(SEL-DI-TOF-MS)及模式识别分类技术—支持向量机(SVM)筛选肺腺癌标志蛋白的可行性。方法将6例新鲜肺腺癌组织标本及其配对的4例正常肺组织制备8μm厚度冰冻切片;改良HE染色;用LCM技术选择性获取同质腺癌细胞和配对正常肺组织细胞。应用PBSⅡ+型SELDI-TOF-MS分析仪(IMAC芯片)分析腺癌及其配对正常细胞的蛋白质表达谱,比对差异点;应用SVM筛选并验证候选标志蛋白的判别效能。结果平均每个LCM帽子的激光点数约4000shots,获得了同质性>95%的肿瘤细胞和正常细胞。比较腺癌和配对正常细胞之间的SELDI谱图,共筛选出84个蛋白峰。将差异最明显的10个蛋白峰作为候选标志蛋白。和正常组织相比,6种蛋白在腺癌中呈低表达,4种蛋白在腺癌中呈高表达,差异有统计学意义(P<0.05)。初步筛选出3191m/z蛋白峰作为腺癌诊断标志蛋白。结论LCM联合SELDI蛋白质芯片技术有可能筛选出敏感性高、特异性强的肺腺癌标志蛋白;该技术将为肺腺癌早期诊断研究提供新的强有力的工具。

• 单位
  浙江大学医学院附属第二医院; 西安交通大学医学院第二附属医院