摘要
目的探讨野生型第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)过表达对体外活化肝星状细胞(HSC)内钙离子浓度的影响。方法体外培养活化大鼠肝星状细胞系(HSC-T6),利用腺病毒载体,将野生型PTEN基因转染活化HSC;Western blot及实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测HSC的PTEN蛋白及m RNA表达;采用钙离子荧光探针Rhod-2/AM,于激光扫描共聚焦显微镜下检测HSC内钙离子浓度变化。实验分组:(1)Control组:腺病毒转染时以DMEM代替病毒液;(2)Ad-GFP组:转染表达绿色荧光蛋白(GFP)的对照空病毒Ad-GFP;(3)Ad-PTEN组:转染携带野生型PTEN基因并表达GFP的重组腺病毒Ad-PTEN。结果野生型PTEN在活化大鼠HSC大量表达,3组HSC内钙离子浓度比较,差异有统计学意义(P<0.05),Ad-PTEN组HSC内钙离子浓度(251.60±90.88)低于Control组(1 953.95±132.99)及Ad-GFP组(1 937.57±115.17),而Control组与Ad-GFP组之间HSC内钙离子浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论野生型PTEN过表达可降低体外活化大鼠HSC内钙离子浓度。
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