转基因DT40细胞导入早期鸡胚后的分布及绿色荧光蛋白表达的研究

作者：孙鹏; 赵晨; 燕丽; 靳文静; 张文新; 李赞东

来源：中国比较医学杂志, 2011, (09): 13-81.

• DT40细胞
• 血管微注射
• 基因表达
• 绿色荧光蛋白
• 鸡胚 DT40 cells
• Blood vessel microinjection
• Gene expression
• Green fluorescent protein
• Chicken embryo

目的为了研究经过基因修饰的体细胞导入到禽类胚胎以后,供体细胞及外源基因是否能在受体胚胎中成活并且外源基因是否可以长期表达。方法筛选得到稳定整合绿色荧光蛋白基因的鸡DT40细胞作为外源蛋白的运载工具,通过血管微注射的方法将其导入到于38.5℃温度条件下孵化65～70 h的鸡胚中,并将操作后的鸡胚在原孵化条件下继续孵化。在孵化的不同时期取移植了DT40细胞的嵌合体胚胎在荧光显微镜下观察荧光细胞的存活与分布情况。并通过PCR以及免疫组织化学方法检测供体细胞在受体中的位置以及绿色荧光蛋白的表达情况。结果荧光标记的DT40细胞可以存活于受体不同的组织器官中,包括:脑、心脏、肝脏等。导入胚胎的整合外源基因...

• 单位
  中国农业大学; 农业生物技术国家重点实验室; 北京教育考试院