摘要
目的 明确非经典Wnt5a/ROR2 通路在ARDS 小鼠体内对小鼠间充质干细胞(mMSCs)向ARDS小鼠的肺组织迁移存留及向ATⅡ细胞分化的作用,以及对mMSCs 修复ARDS 小鼠肺损伤的调节作用.方法 C57BL/6 小鼠随机分为NS+PBS 组(正常对照组),LPS+PBS 组(ARDS 组),LPS+MSC-GFP 组(MSC 对照组),LPS+MSC-ROR2 组(高表达ROR2 的MSC 治疗组),气道内滴入LPS 诱导ARDS 小鼠动物模型,按分组经不同处理后3d,7d,14d(1)处死小鼠留取肺组织,HE 染色行组织病理学检查和肺损伤评分评价肺损伤程度;近红外成像追踪离体肺中NIR815 标记的MSCs 以及免疫荧光染色评价MSCs 在肺组织中的存留;免疫荧光双染色共定位及Western blot 检测肺组织中SP-C 表达水平评价MSCs 在肺组织中向ATⅡ细胞分化;计算肺湿重/体重比评价肺水肿程度.(2)或留取肺泡灌洗液(BALF),ELISA 法检测IL-1beta、IL-6、IL-10的浓度评价肺部炎症反应的强度;ELISA 法检测总蛋白和白蛋白水平评价肺上皮通透性.
-
单位东南大学附属中大医院; 青岛大学附属医院