番茄细菌性叶斑病菌单克隆抗体的制备与鉴定

作者：魏梅生; 田茜; 赵文军; 李桂芬

来源：植物检疫, 2021, 35(04): 45-48.

DOI：10.19662/j.cnki.issn1005-2755.2021.04.008

• 番茄细菌性叶斑病菌
• 单克隆抗体
• 酶联免疫吸附测定

用纯培养的番茄细菌性叶斑病菌(Pseudomonas syringae pv. tomato,Pst)免疫BALB/c小鼠,取免疫好的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用有限稀释和间接ELISA法,筛选得到了1株稳定分泌Pst单克隆抗体的杂交瘤细胞株Pst 10号,经鉴定其分泌的免疫球蛋白亚类为Ig G1型,轻链为κ型。间接ELISA显示该单克隆抗体的效价为1∶1.02×105,亲和常数为9.65×108。用碱性磷酸酯酶标记单克隆抗体所建立的双抗体夹心酶联免疫吸附(DAS-ELISA)测定可有效地检测出Pst的3个菌株,而与其他8种细菌不产生反应。检测灵敏度为105CFU/mL。

• 单位
  中国检验检疫科学研究院