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摘要
目的观察体外培养的人恶性黑色素瘤球体细胞的干细胞特性。方法利用无血清培养基培养人恶性黑色素瘤A375细胞系,获得黑色素瘤球体细胞(球体组)和普通贴壁细胞(贴壁组)。采用Transwell小室检测两组细胞迁移能力。采用免疫荧光法检测两组细胞中的CD20、CD133。取BALB/c小鼠16只,分实验组和对照组(各8只),于小鼠肩胛骨处皮下分别注射球体组、贴壁组细胞各1 m L(104个细胞),观察并比较两组细胞致瘤能力。6周后处死小鼠,取瘤。结果 A375细胞接种于无血清培养基后,可见小的类圆形悬浮细胞球形成并逐渐变大,球内细胞连接紧密,折光性好。球体组细胞迁移能力及细胞中CD20、CD133表达强度均高于贴壁组。注射细胞6周后,实验组小鼠均长出较大肿瘤,对照组小鼠均未见肿瘤生长。取实验组小鼠的肿瘤组织行HE染色,病理诊断为恶性黑色素瘤。结论体外培养的人恶性黑色素瘤球体细胞具有干细胞特性,迁移能力和致瘤能力强,高表达免疫标记CD20、CD133,恶性黑色素瘤存在肿瘤干细胞。
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