薰衣草SRAP-PCR反应体系的建立及优化

作者：阿迪莱·阿布都热依木; 苏秀娟^*; 吕雪梅; 周界光; 尹松松; 龚林涛; 曲延英

来源：分子植物育种, 2020, 18(19): 6418-6423.

DOI：10.13271/j.mpb.018.006418

• 薰衣草(Lavandula angustifolia Mill.)
• SRAP-PCR
• 正交试验设计
• 体系建立及优化

为建立可靠并且稳定的SRAP-PCR反应体系,进一步开展新疆薰衣草种质资源的遗传多样性研究提供帮助。本研究采用L16(45)正交试验设计方法,对薰衣草SRAP-PCR反应体系主要影响因素DNA模板、Mg2+、dNTPs、引物浓度及Taq DNA聚合酶的用量进行了筛选,比较了5个因素对扩增效果的影响。试验结果表明,各因素水平变化对反应体系的影响从大到小依次为:Mg2+>引物>Tap聚合酶>dNTPs>DNA;建立的最佳反应体系为:总体积25.0μL,2.5μL 10×Buffer、Mg2+浓度3.0 mmol/L、d NTPs浓度0.32 mmol/L、引物浓度0.24μmol/L、DNA模板量60 ng、Taq DNA聚合酶用量0.4 U,该体系经验证可以扩增出清晰、稳定且多态性较好的条带,可为开展后续的研究提供技术基础。

• 单位
  新疆农业大学