摘要
目的 探讨脑泰方含药血清通过内质网应激相关通路调控缺氧缺糖/复氧PC12细胞凋亡,从而阐明脑泰方对脑缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法 将PC12细胞分为正常组(常规培养)、模型组(OGD/R)、抑制剂(4-PBA)组及脑泰方低浓度(10%)、中浓度(15%)、高浓度(20%)组。CCK8法检测细胞活力;采用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)试剂盒检测LDH活性;Hoechst 33258染色观察细胞核形态变化;Tunel染色检测细胞凋亡率;免疫荧光法和Western blot检测细胞Beclin-1、LC3、GRP78、CHOP、PERK蛋白表达情况。结果 模型组LDH活性增加,细胞凋亡率增加,细胞存活率下降(P<0.01),GRP78、PERK、CHOP、LC3Ⅱ、Beclin-1蛋白表达明显增加,LC3Ⅰ蛋白表达减少(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,抑制剂(4-PBA)组、脑泰方中浓度组、脑泰方高浓度组LDH活性降低,细胞凋亡率减少,细胞存活率明显增加(P<0.05,P<0.01),GRP78、PERK、CHOP、LC3Ⅱ、Beclin-1蛋白表达明显降低,LC3Ⅰ蛋白表达明显增加(P<0.05,P<0.01)。结论 脑泰方含药血清可有效抑制缺氧缺糖/复氧PC12细胞的凋亡,调控GRP78/PERK/CHOP信号通路,表明脑泰方可能缓解受损神经细胞内质网应激导致的过度自噬状态,进而抑制细胞凋亡,发挥一定的神经保护作用。
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单位湖南中医药大学第二附属医院; 湖南中医药大学; 湖南中医药大学第一附属医院