hPlGF-2基因修饰的骨髓间充质干细胞对皮肤创伤修复及血管形成的作用研究

作者：陈金逸; 陈宗存; 饶朗毓; 黄亚莲; 符茂雄^*

来源：中国美容医学, 2020, 29(10): 106-111.

DOI：10.15909/j.cnki.cn61-1347/r.003995

• 骨髓间充质干细胞
• 腺病毒载体
• 重组质粒
• 胎盘生长因子
• 基因修饰
• 创伤愈合

目的:构建胎盘生长因子hPlGF-2基因腺病毒载体,探讨hPlGF-2修饰的骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)对SD大鼠皮肤愈合的影响。方法:分离培养SD大鼠BMSCs细胞,PCR 法扩增hPlGF-2基因DNA片段,并构建pAdTrack-hPlGF-2重组载体;重组腺病毒pAd/hPlGF-2感染 BMSCs后,倒置显微镜观察EGFP表达情况,PCR与Western blot分别检测hPlGF-2 mRNA和蛋白的表达,MTT法检测BMSCs增殖;构建SD大鼠皮肤割伤模型,以创缘注射感染重组腺病毒pAd/hPlGF-2的 BMSCs为实验组,以创缘注射生理盐水为对照组,HE染色观察创面病理形态变化,免疫组织化学法检测带EGFP(+)的BMSCs在创面的分布情况。结果:成功构建了腺病毒载体 pAdTrack-hPlGF-2,在hPlGF-2基因修饰的BMSCs中检测到了hPlGF-2 mRNA与蛋白的表达,且感染重组腺病毒pAd/hPlGF-2对BMSCs的增殖能力无影响。在大鼠皮肤创面注射hPlGF-2基因修饰的BMSCs后,创面感染程度较轻,愈合速度较快,在创伤后7d和14d观察到EGFP标记的BMSCs出现在创面血管周围和血管内皮处,同时有FⅧ表达。在创伤后7d新生肉芽组织中,bFGF的表达明显增加。结论:hPlGF-2基因修饰的BMSCs能分化为成纤维细胞参与到皮肤创面修复中,并分化为血管内皮细胞参与血管的再生。

• 单位
  海南医学院第二附属医院